AMBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419097
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AMBP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico AMBP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AMBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419097 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ambp codifica a proteína precursora AMBP, que é processada proteoliticamente para gerar a alfa-1-microglobulina e a cadeia pesada 4 do inibidor inter-alfa-tripsina (ITIH4). A alfa-1-microglobulina atua como um sequestrador com atividade redox, capaz de se ligar ao heme, ajudando a limitar o estresse oxidativo e carbonílico, enquanto a ITIH4 está associada à dinâmica da matriz extracelular e a respostas inflamatórias de fase aguda. Em biologia de camundongos, os produtos derivados de AMBP são comumente estudados no contexto de sinalização de estresse sistêmico, redes de proteínas secretadas enriquecidas no fígado e remodelamento ligado a proteases/inflamação. A desregulação dessas vias é relevante para pesquisas sobre inflamação, lesão tecidual e fenótipos associados ao estresse oxidativo, sem implicar desfechos clínicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AMBP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ambp em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ambp, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ambp na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AMBP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ambp para a investigação da sinalização de AMBP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ambp críticos para a função AMBP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ambp para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo AMBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo AMBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ambp. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo AMBP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR AMBP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ambp para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ambp definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.