ALX3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419094-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALX3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ALX3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ALX3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Alx3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALX3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419094-NIC | 20 µg | $410.00 |
ALX3 (aristaless-like homeobox 3) é um fator de transcrição do tipo homeobox paired que regula programas de padronização do desenvolvimento no complexo craniofacial e nos membros, controlando redes transcricionais que coordenam decisões de destino celular, proliferação e morfogênese. Em camundongos, Alx3 contribui para circuitos de regulação gênica que governam o mesênquima derivado da crista neural e a diferenciação epidérmica, interagindo com vias de sinalização mais amplas do desenvolvimento que moldam a padronização ântero-posterior e dorso-ventral. A desregulação de fatores de transcrição da família ALX está associada a malformações congênitas de estruturas craniofaciais e dos membros, tornando Alx3 um locus relevante para o estudo de relações genótipo–fenótipo na biologia do desenvolvimento. Sua expressão rigidamente controlada também fornece um modelo para investigar como fatores homeobox modulam o estado da cromatina e a transcrição específica de linhagem.
ALX3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Alx3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Alx3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Alx3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Alx3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.