ALX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419094
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALX3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ALX3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419094 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Alx3 codifica o fator de transcrição homeobox ALX3, um regulador nuclear necessário para a padronização craniofacial e da região anterior da cabeça durante a embriogênese. O ALX3 influencia programas de expressão gênica que controlam a especificação de células da crista neural, a diferenciação mesenquimal e processos morfogenéticos que moldam as estruturas craniofaciais. Por meio do seu homeodomínio de ligação ao DNA, o ALX3 integra sinais do desenvolvimento para coordenar redes transcricionais restritas a linhagens celulares. A atividade desregulada da família ALX tem sido associada a anomalias craniofaciais congênitas, tornando o Alx3 um alvo relevante para estudos mecanísticos da regulação gênica no desenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ALX3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Alx3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Alx3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Alx3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ALX3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Alx3 para a investigação da sinalização de ALX3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Alx3 críticos para a função ALX3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Alx3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ALX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ALX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Alx3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ALX3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ALX3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Alx3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Alx3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.