alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416366

Visão geral

ATP1A3 codifica a subunidade catalítica alfa 3 da ATPase transportadora de Na⁺/K⁺, uma ATPase do tipo P localizada na membrana plasmática que utiliza a hidrólise de ATP para manter os gradientes transmembranares de Na⁺ e K⁺. Ao moldar o potencial de membrana em repouso, a recuperação do potencial de ação e o transporte secundário, o ATP1A3 influencia a excitabilidade neuronal, a homeostase iónica e o acoplamento energético em tecidos excitáveis. A sua atividade integra-se com processos como a transmissão sináptica, a regulação do cálcio e as respostas celulares ao stress, que dependem de gradientes eletroquímicos. Perturbações genéticas e funcionais de ATP1A3 estão associadas a fenótipos de doenças neurológicas, tornando-o um alvo útil para investigar mecanismos de neurofisiologia e disfunção do transporte iónico.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ATP1A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ATP1A3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ATP1A3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ATP1A3 para a investigação da sinalização de alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ATP1A3 críticos para a função alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ATP1A3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ATP1A3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ATP1A3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ATP1A3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.