ALKBH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407363-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALKBH2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ALKBH2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ALKBH2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ALKBH2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ALKBH2 Anticorpo (C-9): sc-515789
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALKBH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407363-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ALKBH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407363-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALKBH2 codifica uma dioxigenase dependente de Fe(II)/2-oxoglutarato que catalisa a reversão direta de lesões em bases de DNA alquiladas, incluindo 1-metiladenina e 3-metilcitosina, ajudando a restaurar o pareamento normal de Watson–Crick. Essa atividade sustenta a estabilidade do genoma ao limitar danos que bloqueiam a replicação e ao reduzir a mutagênese durante a fase S, atuando nas redes celulares de resposta a danos no DNA e de reparo. ALKBH2 está implicada no manejo da carga de estresse por alquilação endógena e exógena, conectando-se a vias que influenciam a progressão da forquilha de replicação e a manutenção da integridade cromossômica. A capacidade de reparo de DNA desregulada envolvendo ALKBH2 tem sido estudada no contexto da biologia do câncer e da sensibilidade celular a agentes alquilantes, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de respostas ao estresse genotóxico.
ALKBH2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ALKBH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ALKBH2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ALKBH2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ALKBH2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.