Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) ALK: sc-400460-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ALK consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ALK (h) y el plásmido de doble nickasa ALK (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ALK. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ALK Anticuerpo (F-12): sc-398791
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ALK | sc-400460-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ALK | sc-400460-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La quinasa del linfoma anaplásico (ALK) es una tirosina quinasa receptora que regula la proliferación, la supervivencia y la diferenciación celulares mediante señalización dependiente de la fosforilación. Tras la unión del ligando o una activación aberrante, ALK puede acoplarse a vías downstream como RAS–MAPK, PI3K–AKT y JAK–STAT, influyendo en programas transcripcionales y en la dinámica del citoesqueleto. En la biología humana, la actividad de ALK está estrictamente controlada durante el desarrollo, en particular en linajes neuronales, y su desregulación puede reconfigurar las redes de señalización de factores de crecimiento. La expresión alterada de ALK o los reordenamientos genómicos activadores se estudian ampliamente como impulsores oncogénicos que perturban la señalización de quinasas y el control del estado celular.
ALK El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ALK en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ALK. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ALK. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ALK alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.