Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406757

概述

ALDH5A1 编码琥珀酸半醛脱氢酶（SSADH），这是一种线粒体内的 NAD⁺ 依赖性酶，催化琥珀酸半醛氧化生成琥珀酸，从而将 GABA 分解代谢与三羧酸（TCA）循环连接起来。通过调控 GABA 旁路（GABA shunt）的代谢通量，ALDH5A1 有助于调节细胞氧化还原平衡、线粒体代谢以及神经组织中的神经递质周转。SSADH 活性受损与 GABA 来源代谢物的积累及抑制性信号传导的改变有关；在影响神经系统的先天性代谢缺陷研究中，ALDH5A1 也受到关注。这些特征使 ALDH5A1 成为探究线粒体功能与神经递质通路之间代谢串扰的有用靶点。

Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中ALDH5A1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对ALDH5A1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏ALDH5A1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建ALDH5A1缺失的细胞模型，用于Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1 功能至关重要的 ALDH5A1 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 ALDH5A1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 ALDH5A1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Aldehyde dehydrogenase 5-A1/SSADH/ALDH5A1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由ALDH5A1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定ALDH5A1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。