Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405313
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Antibody (G-9): sc-373921
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405313 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
L’ALDH3A2 umano (fatty aldehyde dehydrogenase, FALDH) è un enzima NAD-dipendente che ossida aldeidi alifatiche a catena media e lunga nei corrispondenti acidi grassi, limitando l’accumulo di aldeidi lipidiche reattive generate durante il metabolismo dei lipidi e lo stress ossidativo. È un componente chiave del catabolismo degli alcoli grassi e degli sfingolipidi, inclusa la degradazione delle aldeidi grasse derivate dal turnover di plasmalogeni e lipidi eterei. Controllando il carico di aldeidi, ALDH3A2 contribuisce all’omeostasi dei lipidi di membrana e all’equilibrio redox cellulare. Varianti con perdita di funzione sono associate alla sindrome di Sjögren–Larsson e vengono studiate nel contesto della patologia neurocutanea e della tossicità cellulare mediata dai lipidi.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ALDH3A2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ALDH3A2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ALDH3A2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ALDH3A2 per lo studio della segnalazione di Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ALDH3A2 critici per la funzione di Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ALDH3A2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ALDH3A2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ALDH3A2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ALDH3A2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.