ALB/Albumin Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400269-LAC

O ALB humano codifica a albumina, a proteína plasmática mais abundante sintetizada pelos hepatócitos, essencial para manter a pressão oncótica e amortecer a distribuição do fluido extracelular. A albumina liga-se e transporta ácidos graxos, bilirrubina, hormônios esteroides e uma ampla variedade de xenobióticos, sustentando a homeostase metabólica hepática e a entrega sistêmica de nutrientes. A expressão de ALB está intimamente ligada à diferenciação dos hepatócitos e a programas transcricionais específicos do fígado, incluindo redes reguladas por HNF e C/EBP que coordenam o manejo de lipídios, a desintoxicação e a função secretória. A produção desregulada de albumina é amplamente utilizada como indicador molecular de capacidade sintética hepática comprometida e de fisiologia hepática alterada em diversos contextos de pesquisa sobre lesão hepática e doenças metabólicas.

As Partículas de Ativação Lentivirais ALB/Albumin (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de ALB numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais ALB/Albumin (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição ALB, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ALB/Albumin. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo ALB e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.