AlaRS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404252-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AlaRSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AlaRS (h) e o Plasmídeo Double Nickase AlaRS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AARS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AlaRS Anticorpo (A-6): sc-165990
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AlaRS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404252-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AlaRS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404252-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AARS codifica a alanil-tRNA sintetase humana (AlaRS), uma aminoacil-tRNA sintetase citosólica que liga alanina ao seu tRNA cognato, garantindo uma decodificação precisa durante a tradução. Ao manter a fidelidade do carregamento de tRNA, a AlaRS sustenta a proteostase global e se conecta a respostas celulares ao estresse que monitoram o controle de qualidade translacional. A perturbação da atividade de aminoacil-tRNA sintetases pode desestabilizar a homeostase da síntese proteica e tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, destacando o AARS como um ponto útil para estudar como vias ligadas à tradução influenciam a aptidão celular. A função de AARS também é relevante para investigações sobre biologia de tRNA, dinâmica ribossomal e alterações de sinalização a jusante desencadeadas por aminoacilação prejudicada.
AlaRS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AARS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AARS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AARS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AARS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.