AKAP 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405430
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AKAP 9 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico AKAP 9, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AKAP 9 Anticorpo (7E12): sc-517030
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AKAP 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405430 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
AKAP9 codifica a proteína de ancoragem da A-quinase 9 (AKAP 9), um grande arcabouço (scaffold) que organiza espacialmente a PKA e outras enzimas de sinalização em locais subcelulares específicos. A AKAP 9 localiza-se nos centrossomos e no aparelho de Golgi, dando suporte à organização dos microtúbulos, à integridade do Golgi e à coordenação da progressão do ciclo celular e da dinâmica do fuso mitótico. Por meio de sinalização quinásica compartimentalizada, influencia processos guiados por fosforilação que regulam a remodelação do citoesqueleto e o tráfego intracelular. Alterações na expressão de AKAP9 ou rearranjos foram relatados em câncer e outros distúrbios proliferativos, tornando-a um alvo útil para estudar redes de sinalização desreguladas e a estabilidade cromossômica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AKAP 9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AKAP9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AKAP9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AKAP9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AKAP 9.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AKAP9 para a investigação da sinalização de AKAP 9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AKAP9 críticos para a função AKAP 9
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AKAP9 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo AKAP 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo AKAP 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AKAP9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo AKAP 9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR AKAP 9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AKAP9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AKAP9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.