AKAP 7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406308
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AKAP 7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico AKAP 7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AKAP 7 Anticorpo (1F9): sc-517021
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AKAP 7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406308 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
AKAP7 (proteína ancoradora da proteína quinase A 7) é um “scaffold” de PKA que restringe espacialmente a sinalização dependente de AMPc ao ancorar a proteína quinase A a microdomínios subcelulares definidos. Por meio da compartimentalização da PKA e de efetores associados, a AKAP7 ajuda a coordenar eventos de fosforilação que regulam a atividade de canais iônicos, a excitabilidade de membrana e programas transcricionais a jusante responsivos ao AMPc. Essa sinalização ancorada contribui para o controle fino da dinâmica celular, como o manejo de cálcio e respostas acopladas a estímulos, em tecidos excitáveis e não excitáveis. A desregulação das redes de “scaffolding” de AMPc/PKA, incluindo alterações na sinalização dependente de AKAP7, é relevante para estudos mecanísticos de eletrofisiologia cardíaca, sinalização neuronal e patologias mais amplas ligadas à compartimentalização aberrante de quinases.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AKAP 7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AKAP7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AKAP7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AKAP7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AKAP 7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AKAP7 para a investigação da sinalização de AKAP 7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AKAP7 críticos para a função AKAP 7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AKAP7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo AKAP 7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo AKAP 7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AKAP7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo AKAP 7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR AKAP 7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AKAP7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AKAP7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.