AKAP 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408185-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AKAP 3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AKAP 3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AKAP 3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AKAP3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AKAP 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AKAP 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKAP3 (proteína de ancoragem da A-quinase 3) é uma proteína humana do tipo “scaffold” que ancora a proteína quinase A (PKA) dependente de AMPc e enzimas de sinalização associadas a domínios subcelulares definidos, sustentando eventos de fosforilação espacialmente restritos. É mais conhecida por suas funções na biologia dos espermatozoides, em que a ancoragem de PKA e de efetores relacionados contribui para a função do flagelo, a motilidade e a sinalização associada à capacitação. Ao organizar microdomínios localizados de sinalização AMPc/PKA, a AKAP3 influencia a regulação, dependente de fosforilação, de processos do citoesqueleto e associados à membrana. A expressão alterada ou a relocalização inadequada de proteínas scaffold da família AKAP tem sido associada à desregulação da sinalização em distúrbios reprodutivos e em outros contextos em que a sinalização compartimentalizada por quinases é crítica.
AKAP 3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AKAP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AKAP3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AKAP3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AKAP3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.