AIP4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421158-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AIP4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AIP4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase AIP4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Itch. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AIP4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421158-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse Itch codifica a AIP4, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo HECT que catalisa a transferência de ubiquitina para regular a renovação, o tráfego e a amplitude de sinalização de proteínas. A AIP4 modula vias imunes e inflamatórias, incluindo a ativação e a diferenciação de células T, e interage com redes de sinalização próximas ao receptor, como Notch e NF-κB, por meio do controle dependente de ubiquitinação de adaptadores e receptores-chave. Ao moldar a triagem e a degradação dependentes de ubiquitina, a ITCH influencia a apoptose, as respostas ao estresse celular e a manutenção da homeostase imune. A atividade desregulada de ITCH/AIP4 tem sido associada a fenótipos de desregulação imune e a saídas de sinalização alteradas relevantes para processos inflamatórios e semelhantes aos autoimunes em modelos experimentais.
AIP4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Itch em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Itch. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Itch. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Itch interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.