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Ah Receptor双切口酶质粒(m) | sc-419054-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ah Receptor双切口酶质粒(m2) | sc-419054-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Ahr 基因编码芳烃受体(AhR)。AhR 是一种由配体激活的转录因子,能够感知外源性化合物以及内源代谢物,从而调控解毒组织和屏障组织中的基因表达程序。AhR 被激活后会转位进入细胞核,与 ARNT 形成二聚体,并结合外源物反应元件(xenobiotic response elements),诱导细胞色素 P450 等靶基因表达,同时整合与 NF-κB、Wnt/β-连环蛋白等炎症与代谢通路的串扰。AhR 信号可调节上皮稳态、抗原呈递细胞功能以及 T 细胞分化,从而塑造黏膜免疫并影响机体对环境信号的应答。Ahr 活性失调与毒物敏感性、炎症表型及肿瘤生物学有关,因此常被用作研究基因-环境相互作用机制的关键节点。
Ah Receptor 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ahr 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ahr内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ahr的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ahr基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。