AGRP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402410-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AGRPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AGRP (h) e o Plasmídeo Double Nickase AGRP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AGRP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AGRP Anticorpo (MM0085-32B12): sc-517457
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AGRP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402410-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AGRP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402410-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AGRP codifica a proteína relacionada ao agouti, um neuropeptídeo produzido principalmente por neurónios do hipotálamo que atua como antagonista endógeno/agonista inverso dos recetores de melanocortina, especialmente MC3R e MC4R. Ao contrariar a sinalização melanocortínica, o AGRP ajuda a regular a homeostase energética, o comportamento alimentar e as respostas neuroendócrinas através de vias interligadas que envolvem peptídeos derivados de POMC e circuitos responsivos à leptina/insulina. Alterações na sinalização de AGRP têm sido implicadas na desregulação do controlo do apetite e da regulação do peso corporal, sendo frequentemente estudadas no contexto da biologia das doenças metabólicas e dos circuitos hipotalâmicos. Como peptídeo secretado, o AGRP também oferece um modelo acessível para investigar o processamento de neuropeptídeos, a secreção e a sinalização mediada por recetores em sistemas neuronais.
AGRP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AGRP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AGRP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AGRP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AGRP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.