Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Agrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419044
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Agrin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Agrin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Agrin Anticorpo (D-2): sc-374117
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Agrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419044 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Agrn** codifica a agrina, um grande proteoglicano de sulfato de heparano da matriz extracelular que organiza as interações célula–matriz e molda uma arquitetura sináptica especializada. Em camundongos, a agrina é mais conhecida por coordenar a maturação da junção neuromuscular por meio de redes de sinalização que promovem o agrupamento de receptores de acetilcolina e estabilizam a diferenciação pré- e pós-sináptica, ao mesmo tempo em que influencia a estrutura da membrana basal e a conectividade neuronal. Além das sinapses, a agrina contribui para a mecanotransdução e para vias relacionadas à adesão que afetam a organização do citoesqueleto e a integridade tecidual. A desregulação da biologia da agrina tem sido associada a fenótipos neuromusculares e do neurodesenvolvimento, bem como a alterações no remodelamento da matriz em contextos relevantes para disfunções teciduais associadas a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Agrin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Agrn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Agrn, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Agrn na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Agrin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Agrn para a investigação da sinalização de Agrin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Agrn críticos para a função Agrin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Agrn para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Agrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Agrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Agrn. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Agrin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Agrin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Agrn para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Agrn definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.