ADM CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419009

概要

アドレノメデュリン（ADM）は、マウスのAdm遺伝子にコードされる分泌性の血管作動性ペプチドで、主としてRAMP2またはRAMP3と複合体を形成したカルシトニン受容体様受容体を介してシグナルを伝達し、cAMP/PKA依存性の応答を引き起こします。ADMは血管緊張の調節、内皮バリア機能、血管新生、体液・電解質の恒常性維持に寄与し、内皮細胞や免疫細胞における炎症シグナルも調節し得ます。ADMの作用は、低酸素応答プログラムやストレス適応経路とも交差し、組織灌流やリモデリングに影響を与えます。ADMの発現やシグナル伝達の破綻は、高血圧に関連する血管機能障害や微小血管応答の変化など、心代謝性および炎症性疾患の病態と関連することが示されています。

ADM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAdm遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adm内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Admのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADMタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADMシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adm欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADMの機能に不可欠なAdmエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Admゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびADM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adm遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADM HDRプラスミド（m）および ADM HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdmホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdm標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。