ADM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419009
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADM O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ADM, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419009 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A adrenomedulina (ADM) é um peptídeo vasoativo secretado, codificado pelo gene *Adm* do camundongo, que sinaliza principalmente por meio do complexo do receptor semelhante ao receptor de calcitonina com RAMP2 ou RAMP3, desencadeando respostas dependentes de cAMP/PKA. Ela contribui para a regulação do tônus vascular, a função de barreira endotelial, a angiogênese e a homeostase hidroeletrolítica, e pode modular a sinalização inflamatória em células endoteliais e imunológicas. A atividade da ADM se cruza com programas responsivos à hipóxia e vias adaptativas ao estresse que influenciam a perfusão e a remodelação tecidual. A expressão ou sinalização desregulada de ADM tem sido associada à biologia de doenças cardiometabólicas e inflamatórias, incluindo disfunção vascular relacionada à hipertensão e respostas microvasculares alteradas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ADM (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adm em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adm, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adm na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ADM.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adm para a investigação da sinalização de ADM, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adm críticos para a função ADM
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adm para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ADM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ADM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adm. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ADM Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ADM (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adm para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adm definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.