ADHβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402141-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADHβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADHβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADHβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADH1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADHβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402141-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADHβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402141-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADH1B codifica a subunidade beta da álcool desidrogenase humana (ADHβ), uma oxidorredutase citosólica dependente de zinco que catalisa a conversão dependente de NAD⁺ do etanol e de outros álcoois de cadeia curta nos seus aldeídos correspondentes. Essa atividade enzimática integra-se à desintoxicação de aldeídos e à homeostase redox celular mais ampla ao influenciar o equilíbrio NADH/NAD⁺, conectando-se assim a respostas ao estresse oxidativo e ao metabolismo intermediário. A variação genética e funcional em ADH1B é amplamente estudada pelo seu impacto na cinética do metabolismo do etanol e na carga de acetaldeído, o que pode modular a suscetibilidade à fisiopatologia relacionada ao álcool e às lesões teciduais associadas. ADH1B também atua como um nó metabólico relevante para pesquisas em farmacogenômica e toxicologia envolvendo substratos alcoólicos xenobióticos.
ADHβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADH1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADH1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADH1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADH1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.