Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418999

Visão geral

Adcy9 codifica a adenilato ciclase 9 (AC9/ADCY9), uma enzima associada à membrana que converte ATP em cAMP em resposta à sinalização acoplada a GPCRs, moldando a dinâmica compartimentalizada desse segundo mensageiro. O cAMP derivado de AC9 regula vias dependentes de proteína quinase A e de EPAC, que influenciam redes de fosforilação, transcrição gênica, transporte iônico e adaptação metabólica. Em células de camundongo, a atividade de ADCY9 contribui para saídas de sinalização específicas ao estímulo e para a comunicação cruzada com processos mediados por cálcio e por proteínas G. A desregulação da sinalização de cAMP e alterações na função de ADCY9 têm sido associadas a fenótipos relevantes para a regulação cardiometabólica, a biologia das vias aéreas e vias neurocomportamentais, tornando Adcy9 um nó útil para estudos mecanísticos de transdução de sinal.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adcy9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adcy9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adcy9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adcy9 para a investigação da sinalização de Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adcy9 críticos para a função Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adcy9 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adcy9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adcy9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adcy9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.