Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418996

Visão geral

Adcy6 codifica a adenilato ciclase 6 (AC6/ADCY6), uma enzima associada à membrana que converte ATP em cAMP a jusante da sinalização de receptores acoplados à proteína G. Ao modular a dinâmica do cAMP, a AC6 regula programas de fosforilação dependentes de PKA e EPAC, que influenciam a atividade de canais iônicos, o controle metabólico e respostas transcricionais dependentes de estímulo. Em tecidos de camundongo, a ADCY6 é comumente associada a vias β-adrenérgicas e a outras vias acopladas a Gs que coordenam a contratilidade cardíaca, o tônus da musculatura lisa das vias aéreas e o manejo renal de sal e água. A desregulação da sinalização por cAMP envolvendo a ADCY6 tem sido associada a fenótipos relevantes para os sistemas cardiopulmonar e renal, apoiando seu uso em estudos mecanísticos de integração de sinais de GPCR e homeostase de segundos mensageiros.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adcy6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adcy6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adcy6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adcy6 para a investigação da sinalização de Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adcy6 críticos para a função Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adcy6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adcy6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adcy6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adcy6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.