Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402994-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADCY2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 Anticorpo (F-7): sc-514938
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **ADCY2** codifica a **adenilato ciclase 2 (AC2)**, uma enzima associada à membrana que converte ATP em AMP cíclico (cAMP) a jusante de receptores acoplados à proteína G (GPCRs) ativados. Ao modular a dinâmica do cAMP, a AC2 regula a sinalização de **proteína quinase A (PKA)** e **EPAC**, influenciando a atividade de canais iônicos, a liberação de neurotransmissores e a transcrição gênica dependente de estímulo via **CREB**. A atividade de ADCY2 integra-se às vias de GPCR–Gαs/Gαi e contribui para decisões celulares relacionadas à excitabilidade, ao metabolismo e à adaptação de sinal. Alterações genéticas e de sinalização que afetam a homeostase do cAMP têm sido associadas a fenótipos neuropsiquiátricos e cardiometabólicos, tornando o ADCY2 um alvo relevante para estudos mecanísticos de redes de sinalização impulsionadas por GPCR.
Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADCY2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADCY2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADCY2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADCY2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.