Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402115-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADCY1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Anticorpo (F-10): sc-365350
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402115-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402115-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ADCY1 humano codifica a adenilato ciclase 1 (AC1), uma enzima de membrana estimulada por calmodulina que converte ATP em cAMP em resposta a sinais de cálcio. O cAMP derivado de AC1 ativa PKA e EPAC e modula a transcrição a jusante dependente de CREB, moldando a excitabilidade neuronal, a plasticidade sináptica e a expressão gênica dependente de atividade. Ao integrar a sinalização de GPCRs acoplados a Ca2+ com a dinâmica de segundos mensageiros, o ADCY1 influencia vias associadas a aprendizagem e memória e programas neurodesenvolvimentais mais amplos. A sinalização de cAMP desregulada, ligada a atividade alterada de ADCY1, tem sido estudada no contexto de fenótipos neurológicos e neuropsiquiátricos, reforçando sua relevância para investigações mecanísticas.
Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADCY1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADCY1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADCY1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADCY1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.