ADAR3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402742-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADAR3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADAR3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADAR3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADARB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADAR3 Anticorpo (3.591): sc-73410
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAR3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402742-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADAR3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402742-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADARB2 codifica a ADAR3, um membro enriquecido no cérebro da família das adenosina desaminases que atuam sobre RNA, que se liga a RNA de dupla fita e está implicado na regulação da estrutura do RNA e no controlo pós-transcricional da expressão génica. Ao contrário das ADAR1/ADAR2 cataliticamente ativas, a ADAR3 é frequentemente descrita como inativa quanto à edição, mas pode modular os resultados da edição de RNA A‑para‑I ao competir por substratos de dsRNA e ao influenciar a recodificação de transcritos dependente de edição, o splicing, a estabilidade do RNA e o processamento de miRNA. Por estes mecanismos, a ADAR3 cruza-se com o desenvolvimento neuronal, programas de sinalização sináptica e vias inatas de deteção de RNA que respondem a dsRNA endógeno. Alterações na expressão de ADARB2 têm sido associadas na literatura a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, bem como a assinaturas de edição de RNA desreguladas observadas em contextos de doenças neurológicas.
ADAR3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADARB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADARB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADARB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADARB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.