ADAR1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401611-NIC

ADAR는 인터페론에 의해 유도되는 아데노신 탈아미노화효소인 ADAR1을 암호화하며, 이 효소는 이중가닥 RNA(dsRNA) 구조 내에서 A-to-I RNA 편집을 촉매해 코딩 서열, 스플라이싱, RNA 안정성, miRNA 표적화 등을 재구성한다. ADAR1은 내인성 dsRNA를 편집함으로써 MDA5/MAVS 같은 선천면역 센서의 비정상적 활성화와 그 하위의 I형 인터페론 신호를 억제하여, 자기/비자기 구분이 유지되도록 돕는다. 또한 ADAR1은 스트레스 반응에서 RNA 처리 과정에도 영향을 미치며, 반복 서열과 구조화된 전사체의 편집을 통해 번역 결과를 조절할 수 있다. ADAR1 활성의 조절 이상 또는 RNA 편집 불균형은 인터페론병증, 염증성 표현형, 종양–면역 상호작용의 변화와 연관되어 왔으며, RNA 감시와 선천면역 항상성 연구에서 중요한 핵심 노드로 간주된다.

ADAR1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ADAR 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ADAR 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ADAR의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ADAR 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.