ADAM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407606-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADAM8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADAM8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADAM8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADAM8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADAM8 Anticorpo (F-5): sc-374421
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADAM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADAM8 (uma desintegrina e metaloproteinase 8) é uma protease ancorada à membrana que regula a proteólise pericelular, o shedding (clivagem) de ectodomínios e as interações célula–célula/célula–matriz. Por meio dos seus domínios de metaloprotease e desintegrina, a ADAM8 pode influenciar a adesão e a migração de leucócitos, a remodelação da matriz extracelular e a sinalização inflamatória, integrando-se em vias que coordenam as respostas a lesão tecidual. A alteração da expressão de ADAM8 tem sido associada à desregulação do tráfego de células imunes e a mudanças no microambiente mediadas por proteases observadas em diferentes condições inflamatórias crônicas e em múltiplos contextos tumorais, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de invasão, processos associados à metástase e modulação imune. Essas características tornam a ADAM8 um alvo relevante para dissecar redes de sinalização proteolítica e a regulação de receptores de superfície celular em células humanas.
ADAM8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADAM8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADAM8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADAM8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADAM8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.