ACTR-IIB Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-418977-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTR-IIBO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACTR-IIB (m) e o Plasmídeo Double Nickase ACTR-IIB (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Acvr2b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTR-IIB Anticorpo (G-7): sc-376593
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTR-IIB Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-418977-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACTR-IIB Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-418977-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Acvr2b codifica o receptor de activina tipo IIB (ACTR-IIB), uma quinase de serina/treonina transmembranar que se liga a ligandos da superfamília TGF-β, como a miostatina (GDF8), as activinas e fatores de crescimento relacionados. Após a ligação do ligando, o ACTR-IIB forma complexos de sinalização com receptores do tipo I para ativar programas transcricionais dependentes de SMAD2/3 que regulam a massa do músculo esquelético, a biologia do tecido adiposo, a fibrose e a diferenciação celular. Em sistemas murinos, a sinalização de Acvr2b é amplamente utilizada para estudar o controlo do crescimento e a remodelação de tecidos ao longo de vias musculares e metabólicas, bem como respostas inflamatórias e da matriz extracelular dependentes do contexto. A atividade desregulada da via ACTR-IIB tem sido associada a fenótipos de perda muscular e a alterações da homeostase energética, tornando-a um nó relevante para estudos mecanísticos em modelos de doenças neuromusculares e metabólicas.
ACTR-IIB O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Acvr2b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Acvr2b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Acvr2b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Acvr2b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.