ACTR-IIA CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418976

概要

Acvr2a は、アクチビンA受容体IIA型（ACTR-IIA）をコードする。ACTR-IIA は膜貫通型のセリン／スレオニンキナーゼ受容体で、アクチビンおよび関連する TGF-β スーパーファミリーリガンドに結合し、SMAD2/3 依存的な転写を制御する。マウス細胞では、ACTR-IIA シグナル伝達は、分化・増殖・細胞外マトリックス（ECM）プログラムを協調させることで、胚のパターニング、生殖軸の制御、組織恒常性に影響を与える。この経路は他の TGF-β ファミリー受容体や調節因子とも連携し、発生やリモデリングにおける状況依存的な応答を微調整する。アクチビン／ACTR-IIA シグナルの異常は、線維化リモデリング、炎症に伴う組織変化、増殖制御の異常に関与するとされ、疾患関連表現型の機序研究において重要である。

ACTR-IIA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAcvr2a遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Acvr2a内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Acvr2aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACTR-IIAタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACTR-IIAシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Acvr2a欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACTR-IIAの機能に不可欠なAcvr2aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Acvr2aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACTR-IIA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびACTR-IIA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Acvr2a遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACTR-IIA HDRプラスミド（m）および ACTR-IIA HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAcvr2aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAcvr2a標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。