ACTR-IB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418975
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTR-IB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACTR-IB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTR-IB Anticorpo (ALEX66): sc-73677
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTR-IB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418975 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acvr1b codifica o receptor de activina A tipo 1B (ACTR-IB/ALK4), um receptor quinase de serina/treonina da superfamília TGF-β que transmite sinais de activinas e ligandos relacionados. Após a ligação do ligando e a formação do complexo de receptores, o ACTR-IB fosforila SMAD2/3 para regular programas de transcrição que controlam decisões de destino celular, proliferação, diferenciação e remodelação tecidual. Em sistemas murinos, a sinalização dependente de Acvr1b integra-se com MAPK e outras vias específicas do contexto para moldar respostas de desenvolvimento e de homeostase. A desregulação da sinalização activina/SMAD é comumente utilizada para modelar mecanismos relevantes para fibrose, inflamação, regulação metabólica e fenótipos oncogénicos em contextos experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACTR-IB (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acvr1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acvr1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acvr1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACTR-IB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acvr1b para a investigação da sinalização de ACTR-IB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acvr1b críticos para a função ACTR-IB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acvr1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACTR-IB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACTR-IB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acvr1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACTR-IB Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACTR-IB (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acvr1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acvr1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.