ACTL7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418970
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTL7B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACTL7B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTL7B Anticorpo (F-1): sc-398446
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTL7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418970 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Actl7b codifica a ACTL7B, uma proteína do tipo actina enriquecida nos testículos, implicada na remodelação do citoesqueleto durante a diferenciação de espermátides e a morfogénese dos espermatozoides. Como membro da família das actinas, a ACTL7B está associada a processos que moldam o complexo acrossoma–núcleo e dão suporte à organização de estruturas dependentes de microfilamentos, necessárias para a motilidade e a competência de fertilização. A perturbação da dinâmica da actina em células germinativas está associada à formação anómala da cabeça do espermatozoide, à redução da função espermática e a fenótipos de subfertilidade masculina. Assim, Actl7b serve como um ponto de partida útil para estudar a regulação do citoesqueleto, a espermiogénese e redes génicas que governam a aptidão reprodutiva em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACTL7B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Actl7b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Actl7b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Actl7b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACTL7B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Actl7b para a investigação da sinalização de ACTL7B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Actl7b críticos para a função ACTL7B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Actl7b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACTL7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACTL7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Actl7b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACTL7B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACTL7B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Actl7b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Actl7b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.