Acrosin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418952

개요

Mouse Acr 유전자는 트립신 유사 세린 프로테아제인 아크로신(acrosin)을 암호화하며, 아크로신은 정자 첨체(acrosome)에 지모겐(비활성 전구체)인 프로아크로신(proacrosin) 형태로 저장되었다가 첨체 반응(acrosome reaction) 동안 활성화된다. 아크로신은 정자 머리 부위에서의 단백질 분해성 재형성을 돕고 투명대(zona pellucida) 침투를 지원하며, 정자 수정능 획득(capacitation), 첨체의 외배출(exocytosis), 그리고 생식세포 막 상호작용을 조절하는 과정들과 연동된다. 아크로신 활성의 교란은 수정 능력 결함과 연관되며, 남성 생식생물학을 연구하기 위한 기전적 진입점으로 활용된다. 더 넓은 세린 프로테아제 네트워크의 일부로서 아크로신은 조절되는 지모겐 활성화와 세포외기질 연관 단백질분해를 연구하는 모델을 제공한다.

Acrosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Acr 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Acr 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Acr의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Acrosin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Acrosin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Acr 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Acrosin 기능에 중요한 Acr 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Acr 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Acrosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Acrosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Acr 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Acrosin HDR 플라스미드 (m) 및 Acrosin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Acr 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Acr 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.