acrogranin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420696
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- acrogranin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico acrogranin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
acrogranin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420696 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Grn codifica a acrogranina (progranulina), uma glicoproteína secretada e associada aos lisossomos que modula o crescimento celular, a sobrevivência e a sinalização inflamatória em diversos tecidos. Em camundongos, a acrogranina participa da homeostase endolisossomal e da proteostase e pode influenciar vias ligadas à ativação microglial, a redes de citocinas e ao remodelamento da matriz extracelular. Alterações na função de GRN/acrogranina têm sido associadas à neurodegeneração, a respostas imunes aberrantes e a fenótipos de reparo tecidual, tornando-a um ponto útil para estudar neuroinflamação e a biologia do estresse lisossomal. Processos dependentes de Grn também são relevantes em modelos de remodelamento metabólico e fibrótico, nos quais fatores de crescimento secretados e a função lisossomal se cruzam.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO acrogranin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Grn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Grn, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Grn na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína acrogranin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Grn para a investigação da sinalização de acrogranin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Grn críticos para a função acrogranin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Grn para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo acrogranin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo acrogranin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Grn. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo acrogranin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR acrogranin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Grn para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Grn definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.