ACOX1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401690-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ACOX1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ACOX1 Double Nickase Plasmid (h) e il ACOX1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ACOX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ACOX1 Antibody (153CT43.1.1): sc-517306
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ACOX1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACOX1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACOX1 codifica l’acil-CoA ossidasi 1, l’enzima perossisomiale limitante la velocità che catalizza il primo passaggio della β-ossidazione degli acidi grassi a catena molto lunga e genera perossido di idrogeno come sottoprodotto. Attraverso il suo ruolo nel catabolismo lipidico perossisomiale, ACOX1 contribuisce a mantenere l’omeostasi lipidica cellulare e si integra con la regolazione redox e con le vie di segnalazione metabolica. Un’alterata attività di ACOX1 è stata associata a fenotipi di disfunzione perossisomiale, inclusi l’accumulo di acidi grassi a catena molto lunga e effetti secondari sul metabolismo mitocondriale. La deregolazione della β-ossidazione perossisomiale e delle vie dello stress ossidativo che coinvolgono ACOX1 è rilevante per studi sul neurosviluppo, sul metabolismo epatico e sulle risposte infiammatorie.
ACOX1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ACOX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ACOX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ACOX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ACOX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.