AChE CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401091

개요

인간 ACHE 유전자는 아세틸콜린에스터레이스(AChE)를 암호화하며, AChE는 시냅스와 신경근 접합부에서 아세틸콜린을 빠르게 가수분해하여 콜린성 신경전달을 종결시키는 세린 가수분해효소입니다. 정형화된 시냅스 신호전달을 넘어, AChE 활성은 아세틸콜린의 가용성을 조절함으로써 흥분–수축 연계, 자율신경계 조절, 그리고 콜린성 항염증 신호전달에도 영향을 미칩니다. ACHE의 발현 및 효소 기능 이상은 신경망 기능 변화, 스트레스 및 신경염증 관련 경로, 그리고 신경근 및 신경퇴행성 표현형에 대한 감수성과 연관되어 왔습니다. 막 결합형과 가용성 효소로 존재하며 조직 특이적 아이소폼을 갖는 ACHE는 시냅스 생리, 독성 물질 반응, 콜린성 신호 간 크로스토크를 다루는 모델에서 자주 연구됩니다.

AChE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ACHE 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ACHE 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ACHE의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 AChE 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 AChE 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ACHE 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• AChE 기능에 중요한 ACHE 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ACHE 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• AChE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 AChE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ACHE 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  AChE HDR 플라스미드 (h) 및 AChE HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ACHE 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ACHE 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.