ABCG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401237

Visão geral

ABCG1 (membro 1 da subfamília G dos transportadores cassete de ligação ao ATP) é um transportador de efluxo de colesterol e fosfolípidos que promove a exportação de lípidos para a HDL e ajuda a manter a composição da membrana celular e a homeostase dos esteróis. Atua a jusante da sinalização LXR/RXR e contribui para o processamento do colesterol por macrófagos, a dinâmica das gotículas lipídicas e o tónus inflamatório em células mieloides. Alterações na atividade do ABCG1 têm sido associadas a desregulação do metabolismo lipídico e ativação de células imunitárias, com relevância para a biologia da aterosclerose, a inflamação metabólica e a homeostase do surfactante pulmonar. Em modelos celulares humanos, o ABCG1 é frequentemente estudado pelo seu impacto na formação de células espumosas, nas respostas de citocinas e na comunicação cruzada com transportadores ABC como o ABCA1.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ABCG1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ABCG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ABCG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ABCG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ABCG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ABCG1 para a investigação da sinalização de ABCG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ABCG1 críticos para a função ABCG1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ABCG1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ABCG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ABCG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ABCG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ABCG1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ABCG1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ABCG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ABCG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.