A1Up Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407973-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- A1UpO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase A1Up (h) e o Plasmídeo Double Nickase A1Up (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UBQLN4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:A1Up Anticorpo (A333): sc-136145
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
A1Up Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407973-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
A1Up Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407973-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBQLN4 (A1Up) codifica uma proteína adaptadora do tipo ubiquitina implicada na proteostase, ao acoplar substratos poliubiquitinados a vias de degradação e de controlo de qualidade. A A1Up está associada à renovação dependente de ubiquitina e interage funcionalmente com componentes do sistema ubiquitina–proteassoma e com a depuração ligada à autofagia, influenciando a homeostase proteica em condições basais e de stress. Por meio dessas funções, a UBQLN4 pode afetar as respostas celulares ao stress proteotóxico, à agregação proteica e à remodelação de redes de sinalização que dependem da estabilidade proteica regulada. A desregulação do controlo de qualidade proteica mediado por ubiquitina tem ampla relevância para a neurodegeneração, a biologia do cancro e outras condições em que a proteostase comprometida contribui para a patologia, tornando a UBQLN4 um alvo útil para estudos mecanísticos.
A1Up O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UBQLN4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UBQLN4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UBQLN4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UBQLN4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.