Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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4.1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420186
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- 4.1B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico 4.1B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:4.1B Anticorpo (B-6): sc-398089
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
4.1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420186 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Epb41l3 codifica a proteína 4.1B, um adaptador do citoesqueleto associado à membrana que conecta proteínas transmembrana à rede cortical de actina–espectrina e ajuda a organizar a forma celular, a polaridade e a adesão. Em tecidos de camundongo, a 4.1B contribui para a estabilidade da membrana e para a arquitetura das junções, influenciando processos como o crescimento de neuritos, a migração celular e a sinalização dependente de contato. Por meio de suas funções de andaime, a 4.1B pode modular a distribuição de receptores e de moléculas de adesão, afetando vias de remodelamento do citoesqueleto e a mecanotransdução. Alterações na regulação de EPB41L3/4.1B têm sido associadas a desorganização tecidual e a fenótipos relevantes para supressão tumoral, invasão e homeostase neurológica em modelos experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO 4.1B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Epb41l3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Epb41l3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Epb41l3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína 4.1B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Epb41l3 para a investigação da sinalização de 4.1B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Epb41l3 críticos para a função 4.1B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Epb41l3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo 4.1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo 4.1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Epb41l3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo 4.1B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR 4.1B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Epb41l3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Epb41l3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.