2B28 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-432576

개요

Ubxn1(2B28로도 지칭됨)은 유비퀴틴 의존적 과정들을 AAA+ ATPase인 p97/VCP와 연결해 주는 UBX 도메인 함유 어댑터 단백질을 암호화하며, 기질의 추출과 분해(턴오버)를 조정합니다. 이러한 결합을 통해 UBXN1은 소포체 연관 분해(ERAD), 단백질 품질 관리 조절, 스트레스 반응성 신호전달의 조절을 포함한 단백질 항상성(프로테오스타시스) 제어에 기여합니다. UBXN1은 세포주기 진행과 오접힘 또는 응집되기 쉬운 단백질의 처리에 영향을 미치는 경로에 관여하는 것으로 알려져 있으며, 신경퇴행 및 암 생물학과 관련된 기전들과도 연결됩니다. 마우스 시스템에서 Ubxn1을 교란하는 것은 p97/VCP 중심 네트워크와 유비퀴틴 매개 단백질 복합체 리모델링을 탐구하기 위한 다루기 쉬운 접근법을 제공합니다.

2B28 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ubxn1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ubxn1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ubxn1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 2B28 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 2B28 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ubxn1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• 2B28 기능에 중요한 Ubxn1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ubxn1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• 2B28 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 2B28 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ubxn1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  2B28 HDR 플라스미드 (m) 및 2B28 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ubxn1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ubxn1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.