17β-HSD3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403863-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- 17β-HSD3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase 17β-HSD3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase 17β-HSD3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSD17B3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
17β-HSD3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403863-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
17β-HSD3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403863-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSD17B3 codifica a 17β-HSD3 humana, uma oxidorredutase microssomal que catalisa a conversão dependente de NADPH de androstenediona em testosterona, uma etapa-chave na biossíntese de andrógenos. Essa enzima atua em redes metabólicas de hormônios esteroides que modulam a sinalização do receptor de andrógenos e programas transcricionais a jusante que afetam o desenvolvimento sexual e a fisiologia reprodutiva. A atividade de HSD17B3 contribui para a disponibilidade de andrógenos específica de cada tecido por meio do metabolismo esteroidal intracrino e se integra a vias mais amplas que regulam o fluxo esteroidogênico e o equilíbrio redox. Alterações na função ou na expressão de HSD17B3 são estudadas no contexto de distúrbios do desenvolvimento sexual e fenótipos endócrinos dependentes de andrógenos, bem como dos mecanismos do metabolismo de esteroides em tecidos gonadais e periféricos.
17β-HSD3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSD17B3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSD17B3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSD17B3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSD17B3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.