Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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γS-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419834
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- γS-crystallin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico γS-crystallin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:γS-crystallin Anticorpo (A-3): sc-374265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
γS-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419834 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Crygs codifica a γS-cristalina de camundongo, uma proteína estrutural altamente abundante no citoplasma do cristalino ocular que contribui para a transparência e as propriedades refrativas da lente ao estabilizar conjuntos de proteínas densamente empacotados. Como membro da superfamília das β/γ-cristalinas, a γS-cristalina sustenta a homeostase proteica de longo prazo em um ambiente anucleado, no qual alterações no dobramento, a agregação ou modificações pós-traducionais podem comprometer a transmissão de luz pelo cristalino. A perturbação do equilíbrio das cristalinas se cruza com vias de proteostase, incluindo o dobramento assistido por chaperonas e respostas ao estresse que influenciam a solubilidade proteica ao longo da vida. Perturbações genéticas e bioquímicas das cristalinas são amplamente utilizadas para modelar fenótipos de opacidade do cristalino e para estudar os mecanismos subjacentes à agregação proteica associada à catarata.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO γS-crystallin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Crygs em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Crygs, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Crygs na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína γS-crystallin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Crygs para a investigação da sinalização de γS-crystallin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Crygs críticos para a função γS-crystallin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Crygs para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo γS-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo γS-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Crygs. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo γS-crystallin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR γS-crystallin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Crygs para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Crygs definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.