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γ-catenin双切口酶质粒(m) | sc-421210-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
γ-catenin双切口酶质粒(m2) | sc-421210-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Jup 编码 γ-连环蛋白(plakoglobin),这是一种含 armadillo 重复序列的蛋白,能够将以钙黏蛋白为基础的黏着连接(adherens junctions)和桥粒(desmosomes)与细胞骨架连接起来,从而在小鼠中维持上皮组织与心脏组织的结构完整性。它参与连接结构的组装、力学信号转导(mechanotransduction),并通过与 TCF/LEF、钙黏蛋白复合物等结合伙伴竞争,和 Wnt/β-连环蛋白信号通路发生串扰。γ-连环蛋白的功能或定位发生改变与细胞-细胞黏附受损、分化异常以及影响组织重塑的信号变化相关。体内与细胞层面的研究将 Jup 与类似心肌病的表型和上皮屏障缺陷联系起来,使其成为研究连接生物学与信号整合的一个有价值的关键节点。
γ-catenin 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Jup 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Jup内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Jup的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Jup基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。