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γ-catenin双切口酶质粒(h) | sc-401640-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
γ-catenin双切口酶质粒(h2) | sc-401640-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JUP 编码人源 γ-连环蛋白(plakoglobin),这是一种含 Armadillo 重复序列的蛋白,可将钙黏蛋白介导的黏附复合物连接到肌动蛋白和中间丝细胞骨架。在黏着连接(adherens junctions)和桥粒(desmosomes)中,γ-连环蛋白支持细胞—细胞黏附、组织完整性以及机械信号转导;同时,它也可通过共享的结合伙伴影响与 Wnt/β-连环蛋白相关的转录程序。JUP 表达水平或其在连接处的定位发生改变,与上皮屏障功能受损以及细胞迁移和分化的变化相关,因此在癌症生物学研究以及与桥粒功能障碍相关的心皮综合表型研究中具有重要意义。这些作用使 γ-连环蛋白处于连接组装、细胞骨架组织与调控组织稳态的信号网络交汇点。
γ-catenin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 JUP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对JUP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏JUP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了JUP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。