γC-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402940-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- γC-crystallinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase γC-crystallin (h) e o Plasmídeo Double Nickase γC-crystallin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CRYGC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
γC-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402940-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
γC-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402940-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CRYGC humano codifica a γC-cristalina, uma proteína estrutural altamente abundante no cristalino do olho que contribui para o índice de refração, a transparência e a estabilidade de longo prazo das células de fibra. Como membro da superfamília das β/γ-cristalinas, a γC-cristalina favorece o empacotamento proteico compacto e a resistência à agregação, processos centrais para a proteostase no ambiente das células de fibra do cristalino, em grande parte desprovido de organelas. Alterações no dobramento e na solubilidade das cristalinas se cruzam com respostas ao estresse oxidativo e com a manutenção dependente de chaperonas das proteínas do cristalino, ligando a homeostase desregulada à formação de agregados que dispersam a luz. Variação genética ou estabilidade desregulada da γC-cristalina está associada a fenótipos hereditários de opacidade do cristalino, oferecendo um ponto de entrada molecular para estudar mecanismos relevantes para catarata.
γC-crystallin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CRYGC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CRYGC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CRYGC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CRYGC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.