δENaC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404577-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- δENaCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase δENaC (h) e o Plasmídeo Double Nickase δENaC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SCNN1D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
δENaC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404577-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
δENaC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404577-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCNN1D codifica a subunidade delta do canal epitelial de sódio (δENaC), um canal de Na⁺ não dependente de voltagem e sensível à amilorida, que contribui para a absorção transepitelial de sódio e para a regulação do potencial de membrana. O δENaC pode se associar a outras subunidades do ENaC para influenciar a abertura/fechamento do canal e a seletividade iônica, sustentando a homeostase de eletrólitos e fluidos em tecidos epiteliais. A atividade do ENaC é regulada por processamento proteolítico, ubiquitinação por NEDD4L e sinais que afetam o tráfego do canal e a probabilidade de abertura, conectando o SCNN1D a vias que controlam o transporte epitelial. Alterações na função do ENaC estão implicadas em distúrbios do equilíbrio de sal e fluidos e têm sido estudadas no contexto da hidratação da superfície das vias aéreas e de fenótipos relacionados à pressão arterial.
δENaC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SCNN1D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SCNN1D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SCNN1D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SCNN1D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.