δ-catenin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402493-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- δ-cateninO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase δ-catenin (h) e o Plasmídeo Double Nickase δ-catenin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CTNND2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:δ-catenin Anticorpo (40.1): sc-81793
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
δ-catenin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402493-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
δ-catenin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402493-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTNND2 codifica a δ-catenina humana (membro da família p120-catenina), um adaptador citoplasmático enriquecido nas junções aderentes, onde modula a estabilidade do complexo caderina–catenina e conecta a adesão célula–célula à dinâmica do citoesqueleto de actina. A δ-catenina participa de vias de sinalização que regulam o crescimento de neuritos, a organização sináptica e a motilidade celular, em parte por meio de interações com reguladores de GTPases da família Rho e proteínas de ancoragem (scaffolding) associadas às junções. Alterações na expressão de CTNND2 ou a sua desorganização genômica têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e também têm sido investigadas em contextos de plasticidade epitelial e biologia tumoral, nos quais a remodelação da adesão é um processo-chave. Essas características tornam CTNND2 um alvo útil para estudar a sinalização em junções, a morfogênese neuronal e os mecanismos que acoplam a adesão a programas transcricionais e do citoesqueleto.
δ-catenin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CTNND2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CTNND2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CTNND2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CTNND2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.