β-tectorin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423332

개요

Tectb는 분비성 당단백질인 β-테크토린(β-tectorin)을 암호화하며, β-테크토린은 내이의 덮개막(tectorial membrane) 세포외기질 구조 형성에 기여해 달팽이관 역학에 중요한 초분자 복합체의 조직화를 돕습니다. β-테크토린은 덮개막과 유모세포의 스테레오실리아 사이의 생체역학적 결합을 형성함으로써, 효율적인 기계-전기 변환(mechanoelectrical transduction)과 소리 자극에 의해 유발되는 신호전달을 지원합니다. β-테크토린 관련 네트워크를 포함한 덮개막 기질 성분의 교란은 청각 역치 변화 및 감각신경성 난청 형태와 연관되어 있어, Tectb는 기질 의존적 감각 기능 조절을 연구하는 데 유용한 유전자 좌위입니다. 마우스 모델에서 Tectb의 교란은 세포외기질 조립, 상피 분비, 그리고 청각 처리의 기저가 되는 구조–기능 관계를 분석할 수 있게 합니다.

β-tectorin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tectb 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tectb 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tectb의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 β-tectorin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 β-tectorin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tectb 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• β-tectorin 기능에 중요한 Tectb 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tectb 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• β-tectorin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 β-tectorin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tectb 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  β-tectorin HDR 플라스미드 (m) 및 β-tectorin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tectb 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tectb 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.