β-defensin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419980

Visão geral

Defb1 codifica a β-defensina 1 do camundongo, um pequeno peptídeo antimicrobiano catiônico produzido por células epiteliais e enriquecido em superfícies de barreira, como os tratos respiratório, gastrointestinal e urogenital. A β-defensina 1 contribui para a defesa imune inata por meio de atividade microbicida direta e pela modulação da composição do microbioma mucosal, além de atuar como imunomodulador capaz de influenciar o recrutamento de leucócitos e a sinalização de citocinas. Sua expressão está ligada a programas de diferenciação epitelial e a respostas inflamatórias, conectando Defb1 a processos que regulam a integridade da barreira e as interações hospedeiro–patógeno. Alterações na expressão de defensinas têm sido associadas à suscetibilidade a infecções e a fenótipos de doenças inflamatórias em modelos experimentais, reforçando sua relevância para estudos de imunologia de mucosas e homeostase epitelial.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β-defensin 1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Defb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Defb1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Defb1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β-defensin 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Defb1 para a investigação da sinalização de β-defensin 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Defb1 críticos para a função β-defensin 1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Defb1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo β-defensin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo β-defensin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Defb1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo β-defensin 1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR β-defensin 1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Defb1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Defb1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.