Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
β-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419848
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β-casein O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico β-casein, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β-casein Anticorpo (H-4): sc-166530
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419848 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Csn2 codifica a β-caseína murina, uma importante fosfoproteína secretada por células epiteliais mamárias que contribui para a montagem das micelas de caseína e para o transporte de cálcio–fosfato no leite. Sua expressão é rigidamente regulada durante a gestação e a lactação por sinais de prolactina e glicocorticoides, de forma proeminente por meio de JAK2/STAT5 e de programas transcricionais cooperativos que coordenam a diferenciação da glândula mamária e a função secretória. Como a β-caseína é um marcador canônico de diferenciação lactogênica, a perturbação de Csn2 é amplamente usada para investigar o controle endócrino da maturação epitelial, da secreção de proteínas e da homeostase do cálcio. Alterações na regulação de genes de caseína também são informativas para modelar estados desregulados do desenvolvimento mamário e para avaliar como sinais hormonais e inflamatórios remodelam o transcriptoma de proteínas do leite.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β-casein (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Csn2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Csn2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Csn2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β-casein.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Csn2 para a investigação da sinalização de β-casein, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Csn2 críticos para a função β-casein
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Csn2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo β-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo β-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Csn2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo β-casein Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR β-casein (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Csn2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Csn2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.