Date published: 2026-10-24

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β2A Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400054-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • β2A TubulinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase β2A Tubulin (h) e o Plasmídeo Double Nickase β2A Tubulin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TUBB2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β2A Tubulin Anticorpo (2-RY22): sc-134229
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    β2A Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-400054-NIC
    20 µg
    $410.00

    β2A Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-400054-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    TUBB2A codifica a β2A-tubulina humana, um componente central dos heterodímeros de tubulina α/β que se polimerizam em microtúbulos para sustentar a arquitetura do citoesqueleto, o transporte intracelular e a montagem do fuso mitótico. A dinâmica dos microtúbulos coordena processos que abrangem o tráfego de vesículas, a polaridade celular e a segregação cromossômica, integrando-se ao controle do ciclo celular e às vias de morfogênese neuronal. Alterações na composição de β-tubulina ou a instabilidade dos microtúbulos podem desorganizar programas do neurodesenvolvimento e têm sido associadas a fenótipos de tubulinopatias, incluindo malformações corticais e quadros relacionados à epilepsia. Como proteína do citoesqueleto altamente conservada, a β2A-tubulina também é utilizada para investigar mecanismos de sinalização dependente de microtúbulos e respostas ao estresse em células humanas.

    β2A Tubulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TUBB2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TUBB2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TUBB2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TUBB2A interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.