β2-Adaptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428053
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β2-Adaptin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico β2-Adaptin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β2-Adaptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-428053 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ap2b1 codifica a subunidade β2-adaptina do complexo adaptador AP-2, um componente central da endocitose mediada por clatrina em células de camundongo. A β2-adaptina ajuda a acoplar a seleção de cargas na membrana plasmática à montagem do revestimento de clatrina, coordenando a internalização e a reciclagem de receptores, transportadores e complexos de sinalização. Por meio dessas funções, o AP-2 influencia vias dependentes do tráfego de membranas, como a sinalização de receptores tirosina-quinase, o ciclo de vesículas sinápticas e a dinâmica do citoesqueleto. A perturbação do tráfego mediado por AP-2 é amplamente relevante para estudos de neurobiologia, metabolismo e redes de sinalização oncogênica, nos quais alterações na renovação de receptores e na triagem endossomal podem remodelar as respostas do estado celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β2-Adaptin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ap2b1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ap2b1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ap2b1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β2-Adaptin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ap2b1 para a investigação da sinalização de β2-Adaptin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ap2b1 críticos para a função β2-Adaptin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ap2b1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo β2-Adaptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo β2-Adaptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ap2b1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo β2-Adaptin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR β2-Adaptin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ap2b1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ap2b1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.